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2 Material

Stamm Beschreibung Genotyp Resistenz Quelle/

Referenz

BL21(DE3) Starke

Überexpression

mit T7 Promotor

, dcm, ompT,

hsdS

gal, λ(DE3)

– Novagen,

Darmstadt

(103)

Rosetta(DE3)pLysS Eingeschränkte

Expression und

geringe

Basalexpression,

Plasmid mit 6

Genen für tRNA

von seltenen

Codons

, dcm, ompT,

hsdS

gal, λ(DE3),

pLysSRARE,

(Cam

)

Cam Novagen,

Darmstadt

(108)

2.4.6 Medien und Agarplatten

LB-Medium: 1,0 % (w/v) NaCl, 0,5 % (w/v) Hefeextrakt, 1,0 % (w/v) Trypton

M9-Minimalmedium: 6,0 g/L Na

HPO

, 3,0 g/L KH

, 1 g/L NH

Cl, 0,5 g/L NaCl,

1 mM MgSO

, 0,2 mM CaCl

, 0,2 % Casaminoacids,

0,4 % (w/v) Glucose

SOC-Medium: 0,5 % (w/v) Hefeextrakt, 2 % (w/v) Trypton, 5 mM NaCl,

2,5 mM KCl, 10 mM MgSO

, 20 mM Glucose, pH 7,0 (NaOH)

TB-Medium (109): 23,1 g/L KH

, 12,54 g/L K

HPO

, 12 g/L Trypton,

24 g/L Hefeextrakt, 0,4 % (v/v) Glycerin

Festagarplatten enthielten 1,5% (w/v) Bacto-Agar.

Ampicillin: 100 mg/mL in H

O (steril filtriert)

Carbenicillin 50 mg/mL in H

O (steril filtriert)

Chloramphenicol: 34 mg/mL in Ethanol

Kanamycin: 30 mg/mL in H

O (steril filtriert)

Antibiotika-Stammlösungen wurden wie oben beschrieben hergestellt und als

1:1000-Verdünnung eingesetzt.

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