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5 Ergebnisse

Messenger bei einer Größe von 3500 nt die Gene sdmA, sdmB und sdmC

überdecken würde.

In einem weiteren Versuch wurde die Sonde III von der Membran aus Abb. 12E

entfernt und dies durch eine Autoradiographie überprüft. Anschließend wurde sie mit

der Sonde IIIdown bei 50°C hybridisiert. Trotz der niedrigen Temperatur war ein

Signal nicht nachweisbar, obwohl der Röntgenfilm über einen Zeitraum von 10 Tagen

exponiert wurde (diese Daten sind nicht a/jointfilesconvert/481994/bgebildet). Danach erfolgte nochmals eine

Überprüfung der Qualität der RNA, indem die Membran mit der Sonde I hybridisiert

und diesmal ein Signal in der Autoradiographie gezeigt wurde.

Aufgrund dieser Ergebnisse kann eine gemeinsame Transkription des Gens

stromabwärts von sdmC mit der Gengruppe sdmABC ausgeschlossen werden.

III

sdmC

sdmB

sdmA

122

500

4000

3000

1500

500

4000

3000

1500

Abb. 12: Northern-Blot-Analyse der Gene sdmA, sdmB und sdmC

Im oberen Teil der Abb. sind die Bindestellen der Sonden schematisch angedeutet. Die RNA wurde in

einem 1,5 % Agarosegel aufgetrennt. Es wurden je 20 µg RNA eingesetzt. A: Autoradiographie nach

einer Northern-Hybridisierung mit der Sonde I. B: Autoradiographie nach einer Northern-

Hybridisierung mit der Sonde II. Dabei wurde zur Hybridisierung dieselbe Membran aus A verwendet,

nachdem die Sonde I entfernt wurde. C: Methylenblaufärbung der Membran aus A und B mit der

rRNA 23S und 16S. D: Autoradiographie nach einer Northern-Hybridisierung mit der Sonde III mit

einer zu A unterschiedlichen Membran. E: Methylenblaufärbung der Membran aus D.

Spuren: 1: Gesamt-RNA aus einer selenfreien und 2: aus einer selenhaltigen Kultur.

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