MTD 243-670 Manual do Utilizador Página 25

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4 Material und Methoden
19
RTpac GTGTATGACAAGAAAACCTGGTG RT-PCR
pacsondefw GTTTGTAAAGTGGTAGAACAATTTCG Sonde V
pacsonderv CCAGGTTTTCTTGTCATACACC Sonde V
a
W = A+T, Y = C+T, R = A+G, K = G+T
b
IRD800: Fluoreszenzmarkierung am 5´-Ende des Oligonukleotids (MWG Biotech,
Ebersberg)
4.6 Phagenbank
Es stand eine Genombank von M. voltae in Form einer Phagenbank zur Verfügung
(Noll, I., dieses Labor). Der Hauptanteil der Fragmente lag in der Größe von 5 kb vor.
Die Phagenbank wurde mit dem Lambda ZAP II Express
®
Predigested Vector Kit
(Stratagene, Amsterdam, Niederlande) hergestellt.
4.7 Plasmide
Die in dieser Arbeit verwendeten und hergestellten Plasmide sind in Tab. 3
aufgeführt.
Tab. 3: Plasmide
Plasmid Beschreibung Referenz
Topo pCR 2.1 Zielvektor für die Klonierung von
PCR-Produkten (Amp
r
, Kan
r
)
Invitrogen, Karlsruhe
pGEM
®
-T
Zielvektor für die Klonierung von
PCR-Produkten (Amp
r
)
Promega, Mannheim
pNPAC Integrationsvektor für M. voltae
basierend auf pSL1180 (Pur
r
,
Amp
r
), Ausgangsvektor für die
pNPAC Derivate
Sun J., dieses Labor
pNPAC-sdmA Integrationsvektor für M. voltae mit
sdmA flankierenden Sequenzen
Diese Arbeit
pNPAC-sdmB
Integrationsvektor für M. voltae mit
sdmB flankierenden Sequenzen
Diese Arbeit
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